病毒包裝服務
8年包裝經驗為您提供優質服務。包括慢病毒、腺病毒、腺相關病毒包裝服務。涵蓋sgRNA/Cas9, shRNA, circRNA, LncRNA,mRNA基因過表達,下調,KO等。
慢病毒
1、基因過表達慢病毒包裝服務
產品簡介:
過表達(cDNA)慢病毒產品服務是將客戶的目的基因的cDNA序列連接到不同的慢病毒載體上,通過包裝獲得過表達目的基因的慢病毒顆粒。吉熒生物提供的過表達慢病毒產品適合于人源、小鼠、大鼠等物種的基因的表達。
吉熒生物優勢
后續服務:
多種同類功能試驗對陽性基因的驗證;
體內試驗的驗證(動物模型);
功能基因下游的篩選(敲減后細胞的芯片檢測,Western Blot驗證等)。
可供選擇的載體
2、RNAi慢病毒包裝服務
各種siRNA制備方法比較
吉熒優勢:
慢病毒載體類型:最齊全的病毒包裝載體
安全性:最安全的第三代/第四代慢病毒包裝體系
超高滴度:精心優化的啟動子和慢病毒包裝細胞,實現超高滴度的病毒包裝
載體容量:獨特的載體設計,最大可高效包裝4kb
高品質服務:客戶導向型的高品質服務,一切以客戶為中心
3、miRNA慢病毒包裝服務
產品簡介:
根據客戶研究的miRNA,將miRNA或者miRNA inhibitor構建到慢病毒載體,生產的病毒顆??梢灾苯佑糜诟腥炯毎蛘邉游飳嶒?。
服務類別:
過表達miRNA慢病毒服務
將成熟miRNA、pre-miRNA或者pri-miRNA構建到慢病毒過表達載體中,其中pri-miRNA(含側翼序列)的方式由于保留了每個microRNA獨自的原始天然雙臂結構,效果更好,是應用最為廣泛的方法。
抑制miRNA慢病毒服務
miRNA抑制劑(miRNA inhibitor)表達后則高效、特異地結合細胞內成熟的靶miRNA,形成穩定的復合物,阻止了miRNA對靶標mRNA的降解或者翻譯抑制,上調miRNA靶標基因的表達。
客戶只需提供miRNA名稱即可,我公司進行載體構建,病毒包裝,提供2X108TU病毒顆粒,對照病毒,實驗報告。
產品優勢:
操作簡潔,無需轉染試劑;
實驗周期短;
對分裂期和非分裂期細胞均有感染作用;
可在短時間內獲得穩定表達特定microRNA/miRNA inhibitor的細胞株。
可供選擇的載體
4、穩定株構建服務
服務簡介:
構建穩定細胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選。最常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選,篩選得到可穩定表達目的蛋白,或者穩定表達沉默特定基因的細胞株。
慢病毒幾乎可以感染所有種類的細胞,并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組,進行長時間的穩定表達,因此,慢病毒常用于制備穩定表達/沉默特定基因的單克隆細胞株。
吉熒生物制備的帶puromycin抗性的慢病毒,在感染目的細胞后,可通過加入puromycin進行選擇性篩選,從而獲得穩定表達shRNA或者特定基因的細胞株。
服務優勢:
先進的慢病毒包裝技術
豐富的細胞培養經驗
專業的技術服務團隊
一流的服務質量
客戶只需提供目的基因的信息,目的細胞及信息等,吉熒完成實驗后提供目的基因穩定株及對照穩定株和實驗報告。
實驗服務報告內容:
本公司構建載體的,提供載體及帶有載體的菌液各一份及相關的序列信息;
構建成功的穩定細胞株,轉染后需要檢測的,參考相關實驗服務;
構建穩定細胞株實驗所需試劑耗材、儀器設備信息、實驗方法各一份;
其他與構建穩定細胞株技術服務相關的信息。
腺病毒
服務簡介
腺病毒是一種無包膜的球型結構的病毒,遺傳物質為線型雙股DNA形式。腺病毒的特點:(1)感染范圍廣對人致病性低;(2)對增殖和非增殖細胞均具有感染性;(3)能有效進行增殖;(4)病毒滴度高;(5)不整合到染色體中,無插入致突變性;(6)外源基因裝載容量大。由于腺病毒的這些特點使其廣泛地應用于體外基因轉導、體內接種疫苗、和基因治療等各個領域。
吉熒生物采用的AdMax重組腺病毒系統通過Cre/loxP 獲得重組病毒,這個過程發生在HEK293細胞中,從而避免在細菌中重組。將攜帶外源基因的腺病毒穿梭質粒與攜帶腺病毒基因組的包裝質粒共轉染包裝細胞,借助Cre/loxP系統的作用實現重組產生腺病毒。該系統有多種優勢,包括克服了傳統共轉染系統重組效率低的缺點;也避免了細菌重組中的種種不確定性;操作簡單,重組效率高,實現了快速高效的腺病毒包裝。另外,研究者還可以根據不同的實驗需求構建相應的腺病毒穿梭載體。
技術特點
※復制缺陷型腺病毒顆粒,對分裂期和非分裂期細胞均有感染作用;
※無需任何轉染試劑,操作簡單;
※適用于在難轉染的細胞中進行RNA干擾、過表達特定基因或過表達特定microRNA研究和In vivo 實驗;
※不適用于感染腺病毒以后細胞發生死亡和分化的敏感細胞和需要長期穩定表達目的基因的實驗。
腺相關病毒
吉熒生物在包裝腺相關病毒時有多種不同的AAV血清型可供客戶選擇,建議客戶針對不同組織器官選擇相應血清型的AAV病毒,見下表。
不同AAV血清型對相同的組織和細胞具有不同的感染效率。
過表達AAV載體
RNAi AAV載體
miRNA 過表達AAV載體
miRNA抑制表達 AAV載體
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